כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC)

Aug 08, 2020

למרות אלקטרופורזה ג'ל דו מימדי (2-DE) היא שיטה נפוצה לניתוח הפרוטום כולו, יש לו מגבלות כגון יכולת הפרדה מוגבלת, השפעה מפלה, נהלי הפעלה מסובכים. לעתים קרובות קשה להשיג תוצאות משביעות רצון לניתוח של טווח דינמי גדול, שפע נמוך וחלבונים הידרופוביים. צ'ונג ואח ' השתמשו בספקטרומטריית HPLC / מסה כדי להשוות ולנתח את הביטוי הדיפרנציאלי של חלבונים טרום ממאירים וסרטניים. החלבון הופרד על ידי HPLC, והשברים שנאספו זוהו על ידי MALDI-TOF-MS, כך שהחלבון נותח כמותית בביטוי הדיפרנציאלי של שני סוגי התאים. כסוג חדש של טכנולוגיית הפרדה, כרומטוגרפיה נוזלית רב ממדית אין מגבלה של מסה מולקולרית יחסית נקודה isoelectric. באמצעות שילוב של מצבים שונים, זה מבטל את ההשפעה המפלה של אלקטרופורזה ג'ל דו מימדי. יש לו את המאפיינים של קיבולת שיא גבוהה ואוטומציה קלה. כרומטוגרפיה דו מימדית של חילופי יון הפוכים (2D-IEC-RPLC) היא מערכת הפרדת הכרומטוגרפיה הנוזלית הרב-ממדית הנפוצה ביותר במחקר פרוטאומיקה.

שלח החקירה